Лавҳаҳои мувофиқ | 1, 3, 5, 8. |
Филтратсия | филтратсия бо зарба, филтратсияи ҷав |
Шумораи портҳои тазриқӣ | 5, 6, 7, 8, 9, 10. |
Намудҳои табақҳои мувофиқ | Пластинкаи C18, плитаи чуқури чоҳ, плитаи синтетикӣ (бо аксари плитаҳои синтетикӣ мувофиқ аст), плитаи микротитр |
Модул | як меҳвар ё меҳвари дугона |
Шиддат | 220В |
Кафолат | 1 сол |
Фармоишгар | Қабул карда шудааст |
1. Гель электрофорези хроматографияи тозакунӣ
Барои тозакунӣ хроматографияи электрофорези гели денатурии полиакриламидро истифода баред.Агенти денатуризатсия одатан 4М формамид ё 7М мочевина мебошад, консентратсияи акриламид дар байни 5-15% ва ҳиссаи метакриламид асосан байни 2-10% аст.
Пас аз электрофорез бояд мавқеъи банди кислотаи нуклеинро дар зери шуоъҳои ултрабунафш муайян кард, гели дорои кислотаи нуклеинҳои мақсаднокро бурида, кислотаи нуклеинро шикастан ва шуста кардан ва сипас маҳлули шустаро консентратсия, намак, миқдор ва лиофилизатсия карда мешавад.
2. DMT-On, HPLC поксозӣ
Ҳангоми синтез ҳолати DMT-On -ро интихоб кунед, маҳсулоти хом дар ҳарорати хонагӣ центрифуга карда шуд ва консентратсия карда шуд, то пас аз аминолиз аммиаки зиёдатиро хориҷ кунад.
Ҷудокунӣ бо истифода аз сутуни C18 бо ацетонитрил ва 10% кислотаи триэтиламин-асетитӣ (TEAA) ҳамчун элюент анҷом дода шуд.Пас аз ба итмом расидани элюсия, он консентратсия карда мешавад ва сипас гурӯҳи DMT бо кислотаи trifloroacetic хориҷ карда мешавад.Пас аз безараргардонӣ баъзе намакҳо ва молекулаҳои хурд тавассути найчаи бурида хориҷ карда мешаванд ва дар ниҳоят намак тоза карда мешаванд.
Бо ин усул метавон маҳсулоти дорои тозагии баландтарро ба даст овард, аммо ба пайдоиши депуринатсия диққат додан лозим аст.
3. DMT-Off, тозакунии HPLC
Ҳангоми синтез DMT-Off-ро интихоб кунед ва маҳсулоти хом центрифуга карда шуд ва дар ҳарорати хонагӣ консентратсия карда шуд, то аммиаки барзиёд пас аз аммонолиз хориҷ карда шавад.
Ҷудокунӣ бо истифода аз сутуни C18 бо ацетонитрил ва 10% кислотаи триэтиламин-асетитӣ дар об ҳамчун элюент анҷом дода шуд.Пас аз ба итмом расидани ҷудокунӣ ва миқдор, аликвотҳо лиофилизатсия карда мешаванд.
Ин усул бодиққат танзим кардани шароити ҷудокуниро талаб мекунад ва инчунин метавонад молекулаҳои нисбатан тозаи ҳадафро ба даст орад.