Принсипи асосии синтези ДНК

Синтези химиявии ДНК ба стратегияи синтези марҳилаи сахт ва химияи фосфорамидит асос ёфтааст.Фарқият аз синтези биологии ДНК, мавод дар синтези кимиёвии ДНК DMT (4, 4-диметокситритил) ва дезоксирибоксизиди фосфорамиди тағирёфта, тавре ки дар расми 1 нишон дода шудааст.Сутуни синтези олиго), яъне CPG (шишаи сӯрохии идорашаванда) ва PS (полистирол) ва тамоми синтез дар якСинтезатори ДНК/РНК, ки таҷҳизоти асосии мост, дорои модели гуногун аст: Синтезатори ягонаи HY, HY-12, HY-192 ва ғайра, самти синтез аз 3' то 5' ва нуклеотид ба дастгирии сахт тавассути як ворид карда мешавад. давраи синтез.Сикли маъмулан синтез аз чор марҳила иборат аст: Деҳифот, пайвастшавӣ, пӯшидан ва оксидшавӣ (расми 2).Демуҳофизат барои нест кардани гурӯҳи DMT дар такягоҳи сахт ё гурӯҳи 5' гидроксил дар нуклеозиди қаблӣ таъин шудааст, кислотаи 3% трихлороасетикӣ дар дихлорометан ҳамчун реагенти муҳофизатӣ истифода мешавад.Сипас ба дезоксирибоксисиди фосфорамиди тағйирёфта иҷозат дода шуд, ки гурӯҳи гидроксилро бо ёрии фаъолкунанда, яъне 5-этилтиотетразол ё 4,5-дицианомидазол, ки фосфитетриэфир (III)-ро ташкил дод, фош кунад ва марҳилаи Пайвастшавиро амалӣ намуд.Қадами басташавӣ барои бастани гурӯҳи гидроксилҳои реаксиянашуда дар ҷараёни пайвастшавӣ, то ҳадди ақалл кам кардани ташаккули пайдарпаии камбудиҳои номатлуб анҷом дода мешавад.Ниҳоят, фосфитетриэстери ноустувор (III) ба фосфортристери устувори химиявӣ (V) бо йод ҳамчун оксидант дар ҳозираи пиридин оксид мешавад.

ДНК-и синтезшуда метавонад аз дастгирии сахт тавассути аминолиз ҷудо шавад, гурӯҳи муҳофизатшудаи 2-цианоэтил дар фосфортристер ва амид дар нуклеобаза дар як вақт ҷудо карда мешавад, Пластинаҳои синтез ва сутунҳои синтез дар рафҳо мустақиман дар камераи реаксия ҷойгир карда мешаванд. азТаҷҳизоти муҳофизатӣ.ДНК-и хомро метавон тавассути HPLC, электрофорез ва OPC мувофиқи дархост омода кард, мо инчунин метавонем ба шумоТаҷҳизоти тозакунӣбарои коркарди баъди.